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熒光顯微鏡觀察細(xì)胞大量表現(xiàn)轉(zhuǎn)染基實(shí)驗(yàn)步驟

來源:miss-z

時(shí)間:2012-9-11 23:41:18

基因轉(zhuǎn)染

如何將基因送進(jìn)細(xì)胞中大量表現(xiàn)

原理:

Transfection reagent 將

Plasmid 包覆，送入細(xì)胞中，

使細(xì)胞大量表現(xiàn)轉(zhuǎn)染基因。

實(shí)驗(yàn)步驟：

1. 取 2 個(gè) eppendorf，加入 Transfection Medium

2. 其一加入欲轉(zhuǎn)染質(zhì)體 Plasmid，另一個(gè)加入 Transfection reagent

3. 各自溷合均勻后，將兩管加在一起，室溫反應(yīng) 30 min 以上

4. 將原培養(yǎng)細(xì)胞 medium 除去，將上混合液加入 well 中

5. 補(bǔ)足 TM，4 ~ 6 hr 后換回原培養(yǎng)細(xì)胞之 medium

6. 24 hr 后用熒光顯微鏡觀察

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