細胞懸浮生長或貼壁單層細胞培養(yǎng)生物顯微鏡
選擇一種組織或細胞系的基本決定因素是將要進行觀察指標的性質(zhì)
。一般的細胞過程,例如DNA合成,膜的滲透性或細胞毒檢測,對
于任何一種細胞類型都是可進行的,而特異性的研究,例如肌小管
的融合、抗體產(chǎn)生或尿素循環(huán)酶的調(diào)節(jié)。則要求能表達這些特異功
能的細胞類型。
器官培養(yǎng)或細胞培養(yǎng)
較初組織培養(yǎng)被認為是接種碎片組織的培養(yǎng),相當(dāng)部分保持整體
的組織結(jié)構(gòu)。現(xiàn)代的組織培養(yǎng)已成為普通名詞,包括器官培養(yǎng),這
是一種接種組織小碎片或整個胚胎器官保持組織學(xué)結(jié)構(gòu)的培養(yǎng)。細
胞培養(yǎng),即組織被機械或酶化技術(shù)分散成單細胞,或取自外植體自
發(fā)遷移的細胞,進行懸浮生長或貼壁單層細胞的培養(yǎng)。
采用何種特殊培養(yǎng)類型要隨情況考慮。器官培養(yǎng)保持了細胞相
互關(guān)系,在較長時間內(nèi)保留組織學(xué)上或生物化學(xué)的分化,在開始培
養(yǎng)后,因接種的創(chuàng)傷以及某些中心區(qū)壞死,通常只保持幾天,甚至
數(shù)周處于不生長的靜止?fàn)顟B(tài)。它們不能增殖,多次重復(fù)時經(jīng)常有較
大的實驗差異,由于幾何學(xué)以及結(jié)構(gòu)上的少量差異,使定量檢查更
為困難。
另一方面細胞培養(yǎng)通常是沒有結(jié)構(gòu)上的機化,失去原有組織類
型的構(gòu)造及其有關(guān)的生物化學(xué)性質(zhì),除非采用特殊培養(yǎng)條件,否則
是達不到穩(wěn)定狀態(tài)。然而,它們可以增殖擴展,分裂成相同的細胞
,它們可以特征化,明確細胞種群并冷凍保存。它們還可以用選擇
培養(yǎng)液生長細胞,物理學(xué)分離或克隆化的方法純化其表型并可獲得
遺傳學(xué)上相當(dāng)一致的特征化的細胞株。
組織來源
胚胎或成體
一般來自胚胎組織的培養(yǎng)物比成體組織更易生存,生長。這大概
與胚胎存在可增殖的前體細胞或胚胎干細胞分化水平較低有關(guān)。成
體組織中生長組分較低,并且大部分是非繁殖的分化細胞,通常位
于有較好構(gòu)造且很難迅速分散的胞外基質(zhì)之內(nèi),開始培養(yǎng)細胞增殖
十分困難而且培養(yǎng)物生命周期短。
胚胎或胎兒組織有很多實用上的優(yōu)點,但應(yīng)該記住,在某些實
例中有些胚胎細胞不同于成體細胞,不能推測它們?nèi)砍墒斐蔀槌?BR>體細胞類型,除非用恰當(dāng)?shù)蔫b定加以證明。