微生物學(xué)技術(shù)檢測相差顯微鏡觀察試驗(yàn)儀器
細(xì)胞生長曲線
當(dāng)細(xì)胞接種于培養(yǎng)瓶后，它們便進(jìn)入2～24小時(shí)的遲緩期，隨
后進(jìn)入對數(shù)生長期(稱之對數(shù)期)較后細(xì)胞匯合成單層細(xì)胞，細(xì)
胞生長減少或不生長即為平衡期。這些時(shí)期對于每個(gè)細(xì)
胞系都有其特性，而且可以得到重復(fù)性好的測量數(shù)據(jù)——遲緩期
時(shí)間長短，對數(shù)期二倍增長時(shí)間以及平衡期飽和密度，決定于環(huán)
境條件是否能保持穩(wěn)定。
生長周期的測定對于設(shè)計(jì)常規(guī)傳代以及實(shí)驗(yàn)方案都是重要
的。每個(gè)時(shí)期中的細(xì)胞行為以及生物化學(xué)特性都發(fā)生有意義的變
化。因此，當(dāng)在細(xì)胞中加入藥物或試劑以及收獲細(xì)胞時(shí)，控制細(xì)
胞
生長周期是十分重要的。從細(xì)胞生長曲線的形狀，也可獲得培養(yǎng)
物繁殖潛力的信息，但通常認(rèn)為分析克隆生長是比較容易
而且較少含混不清或誤解。對于污染經(jīng)常性的檢查是觀察培養(yǎng)液
pH的改變(一般pH下降，但有些霉菌污染時(shí)則pH值升高)，培養(yǎng)液有
無云霧狀物，在顯微鏡下有無細(xì)胞外顆粒狀物質(zhì)或在培養(yǎng)液中有沒
有來路不明的漂浮物。如果已經(jīng)查明發(fā)生污染，丟棄的瓶子不能打
開，應(yīng)立即高壓滅菌。
如果懷疑污染，要移出樣品，用相差顯微鏡觀察，革蘭氏染色
或用標(biāo)準(zhǔn)微生物學(xué)技術(shù)檢查。
支原體的污染：培養(yǎng)物可由培養(yǎng)液中血清、胰蛋白酶或操作本
身感染支原體。支原體感染肉眼觀察不到，但影響細(xì)胞的生長。它
們存在細(xì)胞通常是不明顯的，故應(yīng)間隔一定的時(shí)間(每隔1～3月)檢
查培養(yǎng)物中的支原體是很重要的，因?yàn)樗麄兡車?yán)重地影響細(xì)胞的生
物化學(xué)、抗元性以及生長特性。曾經(jīng)推薦過多種檢查實(shí)驗(yàn)，但較廣
泛使用的是Chen的DNA熒光染色技術(shù)。
