電子顯微鏡用以觀察一般細胞的分子生物學超微結(jié)構(gòu)
透射電鏡觀察法
電子顯微鏡,開拓了對超微觀世界的觀察,使醫(yī)學生物學有可能步
入分子生物學領(lǐng)域。它不僅可用以觀察一般細胞的超微結(jié)構(gòu),而且還可
用以探討其分子結(jié)構(gòu)。使用掃描電鏡還可以觀察生物細胞三維空間的立
體表面,使人們的認識不斷深化。蚊細胞培養(yǎng)過程中,需定期進行電鏡
檢查,以確定培養(yǎng)物是否受到病毒或支原體的污染。同時用透射電鏡可
以研究蚊細胞的超微結(jié)構(gòu)及其與功能的關(guān)系,研究殺蟲劑,特別是生物
殺蟲劑的作用機制等。
透射電鏡是利用電子射線穿透標本而成像放大的一種顯微鏡,可用
來觀察細胞內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu)以及微生物(如病毒、支原體)和生物大分子
。透射電鏡有:一般透射電鏡,用于超薄標本的觀察,高壓電鏡,可觀
察較厚的樣品,超高壓電鏡,可直接觀察培養(yǎng)細胞的活體標本。這里僅
介紹一般透射電鏡技術(shù),
1.取材
試劑:Palade緩沖液的配制
A液: 巴比妥鈉2.04g
取材要注意選擇生長旺盛的細胞,這時細胞形態(tài)較好。取材必需敏
捷輕巧,避免拉、壓等機械損傷,盡量保持其活性狀態(tài)。所用的器材要
干凈,橡皮刮,盛器不要有污物。
2,固定
離體細胞易發(fā)生自溶或酶活性減低,應(yīng)以固定劑將細胞的結(jié)構(gòu)與成
分固定,并保持細胞微細結(jié)構(gòu)接近正常生活狀態(tài)。固定是生物電子顯微
鏡樣品中較重要的一環(huán)。