細(xì)胞直接計(jì)數(shù)-通過(guò)顯微鏡對(duì)每個(gè)方格中細(xì)胞計(jì)數(shù)
細(xì)胞濃度的定量
培養(yǎng)基中細(xì)胞濃度的定量對(duì)于微生物生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)和計(jì)量學(xué)的確定有
著至關(guān)重要的作用。細(xì)胞濃度量化的方法可分為兩類(lèi)：直接法和間接法
。在許多情況下，由于培養(yǎng)基中懸浮的固體或者其他干擾物質(zhì)的存在，
不能采用直接法。測(cè)量細(xì)胞的數(shù)量還是測(cè)量細(xì)胞的質(zhì)量取決于所需信息
的類(lèi)型和體系的性質(zhì)。當(dāng)只需測(cè)一種濃度時(shí)，通常優(yōu)先選擇測(cè)細(xì)胞質(zhì)量
濃度，但通常希望兩種濃度都測(cè)量。
細(xì)胞數(shù)量濃度的測(cè)定
Petroff—Hausser載玻片或血細(xì)胞計(jì)數(shù)器常用于細(xì)胞的直接計(jì)數(shù)。
在這種方法中，經(jīng)校準(zhǔn)的方格置于培養(yǎng)室的上方，通過(guò)顯微鏡對(duì)每個(gè)方
格中的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。為了進(jìn)行可靠的統(tǒng)計(jì)，至少要對(duì)20個(gè)方格的細(xì)胞
進(jìn)行計(jì)數(shù)并取平均值。培養(yǎng)基必須清潔且無(wú)顆粒，因?yàn)轭w粒會(huì)遮蔽細(xì)胞
或與細(xì)胞混淆�？梢酝ㄟ^(guò)染色區(qū)分死細(xì)胞與活細(xì)胞。這種方法適合非聚
集的培養(yǎng)。由于具有形成菌絲體的特性，這種方法難以用于霉菌的計(jì)數(shù)
。
含有適當(dāng)培養(yǎng)基的瓊脂凝膠平板(培養(yǎng)皿)用于活細(xì)胞的計(jì)數(shù)(本文
中“活”的意思是指具有繁殖能力)。培養(yǎng)樣品稀釋后涂布于瓊脂表面
，進(jìn)而對(duì)這些平板進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)期瓊脂表面的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。結(jié)果
用菌落形成單位表示。如果細(xì)胞形成聚集體，那么一個(gè)單菌落就可能不
是由單個(gè)細(xì)胞形成的。這種平板計(jì)數(shù)法更適合于細(xì)菌和酵母菌的計(jì)數(shù)，
但不太適合霉菌的計(jì)數(shù)。必須對(duì)大量的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)才能得到統(tǒng)計(jì)學(xué)上
可靠的結(jié)果。由于一些培養(yǎng)基比另一些培養(yǎng)基更有利于生長(zhǎng)，因此必須
仔細(xì)選擇培養(yǎng)基�；罴�(xì)胞數(shù)可能變化，這取決于培養(yǎng)基的組成。從單個(gè)
細(xì)胞開(kāi)始，可能需要繁殖25代才能形成一個(gè)容易觀察的菌落。除非選擇
合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，否則即使有代謝活力的細(xì)胞也可能不形成菌
落。
