熒光顯微鏡光源是激光器較窄波長(zhǎng)范圍內(nèi)產(chǎn)生光
相對(duì)于傳統(tǒng)顯微鏡來(lái)說(shuō),檢測(cè)光路中的點(diǎn)照明器與針孔可提高
橫向及縱向分辨率。而實(shí)際提高幅度取決于針孔大小。熒光成像時(shí)
,分辨率還會(huì)受到發(fā)射波長(zhǎng)及激發(fā)波長(zhǎng)的影響。
共聚焦顯微鏡有幾種,每一種都有其獨(dú)特之處及優(yōu)勢(shì)所在。熒
光標(biāo)本檢測(cè)較常用激光掃描共聚焦顯微鏡。正如其命名,這些熒光
顯微鏡的光源是激光器,通過(guò)掃描穿過(guò)標(biāo)本的激光束而成像。
激光器在較窄的波長(zhǎng)范圍內(nèi)產(chǎn)生強(qiáng)光。幾種激光器的發(fā)射波長(zhǎng)
及常見熒光團(tuán)的激發(fā)光譜。由于氪一氬氣體激光器發(fā)射三種彼此分
離的波長(zhǎng)(488nm、568nm、647nm),可同時(shí)顯示2或3種熒光團(tuán)(如FI
TC、麗絲胺羅丹明和Cy5),所以它被普遍用于多波長(zhǎng)共聚焦顯微鏡
。氪一氬氣體激光器的缺點(diǎn)在于它的壽命很短
激光掃描顯微鏡內(nèi)檢流計(jì)反射鏡的移動(dòng)由計(jì)算機(jī)控制,使其掃描方
式有一定的靈活性。例如,通過(guò)縮小掃描面積及縮短樣本點(diǎn)之間的
距離對(duì)感興趣的部分進(jìn)行放大。此外,許多激光掃描共聚焦顯微鏡
還能對(duì)單一條線進(jìn)行反復(fù)掃描,或者使掃描儀停止移動(dòng)直至只在監(jiān)
視器上的一個(gè)點(diǎn)顯示熒光。