微型生物測(cè)定技術(shù)-細(xì)菌微生物分析圖像顯微鏡
微型生物的細(xì)胞活性測(cè)定技術(shù)
各種熒光探針和染色技術(shù)使我們認(rèn)識(shí)到，無(wú)論是自然環(huán)境中的
細(xì)菌群落，還是純培養(yǎng)群體，都由生理狀態(tài)各異、不同代謝活性的
細(xì)菌組成。因此，以前那些認(rèn)為細(xì)菌個(gè)體問(wèn)無(wú)生理差異，不考慮個(gè)
體間代謝狀態(tài)的不同，僅以細(xì)菌的總豐度為基準(zhǔn)計(jì)量得到的生物參
數(shù)結(jié)果存在著嚴(yán)重偏差。原因很簡(jiǎn)單，那些休眠的、凋亡的、不具
備生理代謝活力的細(xì)菌，當(dāng)然沒(méi)有生態(tài)功能上的貢獻(xiàn)。也就是說(shuō)，
自然細(xì)菌群落中存在一部分“不作為”細(xì)菌。而真正對(duì)我們有用的
卻是那些有代謝活力的細(xì)菌。這就告訴我們，要正確的全面的了解
細(xì)菌在水生生態(tài)系統(tǒng)中的作用，就必須知道細(xì)菌的活性組成。現(xiàn)在
，我們能海洋微型生物生態(tài)學(xué)將細(xì)菌群體區(qū)分為可分裂的有繁殖活
力的類群、具有合成代謝活力的類群、具有呼吸代謝活力的類群、
膜完整的類群、已經(jīng)死亡但尚未降解的類群等等。關(guān)于自然環(huán)境下
細(xì)菌生理狀態(tài)的存在形式的描述也日益增多，如活的但不可培養(yǎng)的
、受脅迫的、有損傷的、休眠的、凋亡的等。這樣劃分生理類型
主要是基于我們的微生物生理學(xué)認(rèn)識(shí)�？梢哉f(shuō)細(xì)胞活性的研究就是
細(xì)胞的各種生理代謝狀態(tài)的確定。
細(xì)菌活性的劃分
在自然狀態(tài)下，各種各樣的原因?qū)е铝思?xì)菌生理異質(zhì)性的發(fā)生
。處于自然水域中的浮游細(xì)菌面對(duì)隨時(shí)改變的環(huán)境，如太陽(yáng)輻射、
有害物質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)的可得性、溫度、氧分壓等等。有些環(huán)境條件的改
變對(duì)于他們來(lái)說(shuō)是致命的。他們具有在新環(huán)境下改變自身以適應(yīng)環(huán)
境的能力。另外微生物本身的變異和細(xì)胞周期行進(jìn)的不同，也會(huì)造
成生理型差異。
要想確定細(xì)胞的生理活力情況，就要有一些單細(xì)胞水平上的活
力指標(biāo)。通常作為細(xì)胞活力指標(biāo)的一些細(xì)胞生理參數(shù)主要有以下幾
方面細(xì)胞膜的完整性
具有完整細(xì)胞膜的細(xì)胞，可以將細(xì)胞內(nèi)容物和外部環(huán)境分隔開(kāi)
，從而形成獨(dú)立的內(nèi)環(huán)境。膜的完整性反應(yīng)了細(xì)胞的內(nèi)部組分是否
受到有效保護(hù)，完整的細(xì)胞膜使得細(xì)胞與其他的有機(jī)物和有機(jī)殘?bào)w
相區(qū)別。一旦細(xì)胞膜受到損害，細(xì)胞就不能維持其基本的電化學(xué)梯
度，這樣的細(xì)胞通常被認(rèn)為是死細(xì)胞，因?yàn)樗膬?nèi)含物完全暴露于
外界環(huán)境并較終被降解掉。膜的完整性測(cè)量不需要細(xì)胞存在代謝活
力，因此這一參數(shù)同樣適用于饑餓的、休眠的和受傷的細(xì)胞。這些
細(xì)胞往往需要先激活或復(fù)蘇才能進(jìn)行較復(fù)雜的代謝功能(這些細(xì)胞
結(jié)果間無(wú)差別)。所有的細(xì)胞都存在DNA，這使其成為了理想的染色
對(duì)象，但單獨(dú)使用可能和其他的生物殘?bào)w和死細(xì)胞產(chǎn)生的信號(hào)相混
。將DNA染色和對(duì)包圍保護(hù)DNA的選擇性半透膜的檢測(cè)相結(jié)合，可說(shuō)
是更合適的方法
