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顯微鏡通常配備有3—4個(gè)物鏡-生物暗視野觀察
顯微鏡通常都配備有3—4個(gè)物鏡,其放大倍數(shù)分別在4×到100 ×之間。物鏡的工作距離指的是在準(zhǔn)確的焦點(diǎn)狀態(tài)下透鏡的外表面 與蓋玻片(如果使用的話)表面或與被觀察樣品之間的距離。數(shù)值孔 徑值越大、分辨率越高,物鏡的工作距離就越短。
在有效放大范圍內(nèi),放大倍數(shù)越大,能看清的被觀察對(duì)象越小 。人眼的分辨能力在0.2 mm,因此物鏡的有效放大倍數(shù)的極限是 其數(shù)值孔徑值的l 000倍。大多數(shù)標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡使用10×目鏡,在使 用油鏡時(shí)達(dá)到其較高放大倍數(shù),即1 000×。在使用高質(zhì)量的物鏡 時(shí),也可以配備15×目鏡,從而獲得l 500×的有效放大倍數(shù),但 在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步提高放大倍數(shù)將并不能使我們看到更多的細(xì)節(jié)。 使光學(xué)顯微鏡的總放大倍數(shù)達(dá)到10 000×是完全做得到的,但這種 放大將僅僅是將一個(gè)模糊的斑點(diǎn)進(jìn)一步擴(kuò)大而已。而電子顯微鏡具 有足夠高的分辨率,可以保證更高的有效放大倍數(shù)。
恰當(dāng)?shù)臉悠氛彰鲗?duì)顯微鏡的分辨率也非常重要。在光源和樣品 之間安裝凹面鏡的顯微鏡所形成的錐形照明光束很窄,數(shù)值孔徑 值也低。而在載物臺(tái)下方安裝鏡臺(tái)聚光器可以改善顯微鏡的分辨率 。作為一個(gè)大的集光透鏡,聚光器可以形成寬的錐形光束投射到載 片并進(jìn)入物鏡,從而增加數(shù)值孔徑值。
暗視野顯微鏡 通過對(duì)照明方式進(jìn)行簡(jiǎn)單的改變,可以對(duì)活的細(xì)胞及生物進(jìn)行觀 察。將一個(gè)中空的光束在樣品上聚焦,只有被樣品反射或折射的光 線才能進(jìn)入物鏡形成物像,其他未經(jīng)反射或折射的光線不能進(jìn)入物 鏡,使得在明亮物像周圍形成黑的背景。正由于這種顯微術(shù)視野的 背景是黑色的,因此被稱為暗視野顯微術(shù)。暗視野顯微鏡可被用于 對(duì)一些細(xì)菌進(jìn)行鑒定,例如體形很薄并具有特定外形的梅毒病原體 梅毒螺旋體。很多細(xì)胞較大的真核微生物的內(nèi)部結(jié)構(gòu)也能用暗視野 顯微鏡進(jìn)行觀察。 |