細胞懸液培養(yǎng)可分為兩類：單層細胞培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)
細胞計數(shù)的方法：首先用0．1克分子量的枸櫞酸溶液，使細胞核
與細胞質(zhì)分離，然后再用O．1％結晶紫溶液，使細胞核染色，將已
染色的細胞用生理鹽水作定量稀釋，并注入細胞計數(shù)器進行計數(shù)。
也可采用不染色直接注入細胞計數(shù)器中計數(shù)。為了增加計數(shù)的準確
性，計數(shù)前必須攪動懸液菠細胞分布均勻；在懸液注入計數(shù)器時，
不要用力太大，只須從吸管中輕輕地擠出一滴懸液，依靠毛潮管的
吸力，使懸液流入計數(shù)器。計數(shù)時，在低倍顯微鏡下數(shù)出四焦姻天
誨中的細胞數(shù)，僅計算有胞漿和胞核的完整細胞數(shù)，根據(jù)以下方程
式，算出每毫升懸液中的細胞數(shù)
如果稀釋細胞的懸液并非l毫升，只須將細胞數(shù)／毫升再乘以
懸液毫升數(shù)，即得懸液中的細胞總數(shù)。
由于染色的細胞核看起來比較清楚，而且可以區(qū)別出正常健康
的細胞核和早期壞死階段的細胞核，為了計數(shù)的準確性，還是采用
染色計數(shù)的方法為好。(近代電子細胞計數(shù)器已逐步代替了細胞計
數(shù)器的計數(shù)方法)。
懸液培養(yǎng)法
細胞懸液培養(yǎng)法可分為兩類：一類是單層細胞培養(yǎng)，或稱定量
培養(yǎng)。細胞在這種培養(yǎng)里雖然是用懸液狀態(tài)接種于培養(yǎng)瓶內(nèi)，但接
種后細胞立即沉入瓶底，固著干玻璃底面進行增殖。因此，這種培
養(yǎng)實際上還是一種靜止狀態(tài)的培養(yǎng)。另一類是懸浮培養(yǎng)，它是一種
活動狀態(tài)的培養(yǎng)，即通過一種特殊的裝置，使懸液不停地滾動，細
胞在培養(yǎng)液中始終保持懸浮的狀態(tài)。這種培養(yǎng)法可使細胞大量的繁
殖，獲得大量的細胞。今僅介紹單層細胞培養(yǎng)法。
單層細胞培養(yǎng)：單層細胞培養(yǎng)，多用于不同實驗條件下細胞的
定量測定和病毒的研究上。
單層細胞培養(yǎng)，其細胞的來源有兩種，一種可先通過母培養(yǎng)，
即先經(jīng)過組織塊的培養(yǎng)而獲得細胞懸液，再進行單層細胞培養(yǎng)。另
一種來源是利用胰蛋白酶或其他酶的消化作用，直接把新鮮組織的
細胞間質(zhì)破壞，使細胞分散成游離細胞，再制成細胞懸液進行單層
細胞培養(yǎng)。一般經(jīng)過母培養(yǎng)的方法比較容易成功，而用組織直接消
化的方法是比較難以成功的。今以免腎為側，說明單層細施培養(yǎng)的
過程。
