相襯顯微鏡用特殊聚光器和物鏡來(lái)強(qiáng)化生物不同結(jié)構(gòu)
相差顯微鏡
許多染料都會(huì)殺死微生物，因而多數(shù)微生物活體無(wú)法進(jìn)行染色觀察
。不經(jīng)染色就觀察活菌體則需要采用相差顯微鏡(Phase-contrast micr
oscopy)技術(shù)。相差顯微鏡用特殊的聚光器和物鏡來(lái)強(qiáng)化生物不同結(jié)構(gòu)
的折射率差異。光通過(guò)具有不同折射率的物體時(shí)會(huì)減速并發(fā)生衍射。不
同介質(zhì)中光速的差異就會(huì)導(dǎo)致亮度的不同。諾爾馬斯基(微分干涉差)顯
微鏡
和相差顯微鏡一樣，諾爾馬斯基顯微鏡(Nomarskimicroscopy)也是
利用折射率的差異來(lái)觀察未染色細(xì)胞及其結(jié)構(gòu)。但微分干涉差顯微鏡的
分辨率比標(biāo)準(zhǔn)相差顯微鏡更高。由于景深(始終處于焦距的標(biāo)本厚度)很
小，它能產(chǎn)生近乎三維的圖像。
熒光顯微鏡
熒光顯微鏡(Fluorescence microscopy)利用紫外線照射激發(fā)分子
，使其釋放出波長(zhǎng)比入射光更長(zhǎng)的光。不同波長(zhǎng)的光呈現(xiàn)出不同亮度的
橙色，黃色或黃綠色。有些微生物，如假單胞菌(Pseudo一17zonas)，
受紫外線照射時(shí)會(huì)自然發(fā)出熒光。而另外一些微生物，如結(jié)核分支桿菌
(Mycobacterium tuberculosis)和蒼白密螺旋體(Treponema pallidum
，梅毒病原菌)，必須經(jīng)發(fā)熒光的染料即熒光染料(fluorochrome)處理
后，它們才能在黑色背景下突現(xiàn)出來(lái)。吖啶橙是一種能結(jié)合核酸的熒光
染料，根據(jù)熒光顯微鏡濾光系統(tǒng)不同，它呈現(xiàn)出明亮的綠色、橙綠色或
黃色。有時(shí)，它被用來(lái)監(jiān)測(cè)樣品中的微生物生長(zhǎng)，它與活細(xì)胞結(jié)合會(huì)發(fā)
出明亮的橙光或綠光。
