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涂片(Smears)就是將一環(huán)微生物培養(yǎng)物涂在載玻片上




來源:yiyi
時間:2017-1-10 17:16:49

涂片(Smears)就是將一環(huán)微生物培養(yǎng)物涂在載玻片上


涂片
  涂片(Smears)就是將一環(huán)微生物培養(yǎng)物涂在載玻片上,可以用來觀
察死的微生物。微生物剛放到載玻片時是活的,但經(jīng)固定步驟就將其殺
死了。制作涂片常是初學(xué)者的難點。如果涂片涂得太厚,就難以觀察單
個細胞;而如果涂得太薄,就可能會找不到微生物。如果將那滴培養(yǎng)物
涂在載玻片上時攪得太厲害,又會破壞細胞原來的排布。這樣,通常以
四聯(lián)體形式(四個一體)存在的微生物就會被看成是單個或成對的菌體。
這常常會使初學(xué)者誤以為他們看到了多種微生物,而事實上,它們都屬
于同一種微生物。

  涂片后應(yīng)使其完全風(fēng)干。然后將其快速通過火焰3~4次。這個過程
稱為熱固定(heat fixation)。熱固定主要有三個目的:①殺死微生物
;②使微生物黏附在載玻片上;③使菌體更容易染色。如果載玻片還沒
在完全風(fēng)干,你就將其在火焰上移動,菌體就會煮沸而被破壞。如果熱
固定不夠,菌體就無法粘在載玻片上,在后續(xù)步驟中易被沖洗掉。任何
活細胞都很難著色。如果熱固定過度,微生物將會被燒毀,你會看到被
破壞的細胞和細胞殘骸。微生物的某些結(jié)構(gòu)(如莢膜),經(jīng)過熱固定就會
被破壞,所以應(yīng)省略這一步驟,只需通過風(fēng)干使之粘附到載玻片上。

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