光源的波長是影響顯微鏡分辨率的原因-光學(xué)技術(shù)
顯微鏡分辨率
物鏡是顯微鏡較重要的部件，它應(yīng)形成一個清晰的物像，而不僅
僅是將其放大，而這就與分辨率相關(guān)。所謂分辨率就是一個透鏡將
兩個靠得很近的微小物體分開或辨析的能力。很多在顯微鏡設(shè)計中
得到應(yīng)用的光學(xué)理論都是德國物理學(xué)家Ernst Abbe在19世紀70年代
建立的。在Abbe公式中，兩物體之間的較小可分辨距離被稱為較小
距離；孔徑角度是經(jīng)被觀察樣品進入透鏡的錐形光束角度的1／2，
分辨率越高，也就能觀察到樣品的更多細節(jié)。
光源的波長是影響分辨率的較主要因素。波長必須小于擬觀察
兩點之間的距離，否則將無法看清。在可見光范圍內(nèi)，藍光(波長4
50~5~nm)波長較短，所提供的分辨率較高。輻射的電磁波譜
數(shù)值孔徑值相對不易理解，其中的是進人物鏡的
光錐角度的一半。經(jīng)由聚光器投射到樣品上的光束是錐形的，如果
形成的光錐的角度較小，其經(jīng)過載片后就無法充分伸展并使形成的
物像中緊密靠近的細節(jié)分開，分辨率就低。相反，如果光錐的角度
較寬，被觀察對象的細節(jié)就可以分得更開并被看清。進入透鏡的光
錐的角度的大小與物鏡自身的特性及其所處的工作介質(zhì)的折射率(n
)相關(guān)。
空氣的折射率是1．00，因此以空氣為工作介質(zhì)的透鏡的數(shù)值孔
徑值都不可能超過1．00，
當用浸沒油取代空氣時，很多原來由于在透鏡及載片表面的反
射和折射而損失的光線可以進人物鏡，從而使數(shù)值孔徑值和分辨率
均得到提高。
顯微鏡的較終分辨率是由物鏡和聚光器的數(shù)值孔徑值共同決定
的，
