單細胞培養(yǎng)分離實驗倒置生物顯微鏡-配備計數(shù)軟件
單細胞系都是從培養(yǎng)的組織中分離得到的。開始培養(yǎng)時，首先把從
植物器官切割下來的新鮮外植體轉(zhuǎn)移到含有合適生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的固體培
養(yǎng)基上。在此培養(yǎng)基上，外植體產(chǎn)生愈傷組織，可以把此初始愈傷組織
與外植體分離，重新轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上培養(yǎng)，從而得到合適數(shù)量的愈
傷組織。這樣的愈傷組織就可以轉(zhuǎn)移到液體培養(yǎng)基中，振蕩培養(yǎng)得到好
的懸浮細胞。懸浮培養(yǎng)能否成功主要取決于初始愈傷組織。有多種外植
體和培養(yǎng)基配方被用于成功誘導愈傷組織的產(chǎn)生等。在這些配方基礎上
改變或調(diào)整的培養(yǎng)基也被廣泛使用。
在這些培養(yǎng)基中加入了維生素、肌醇、蔗糖和生長調(diào)節(jié)劑，特別是
加入細胞分裂素使細胞發(fā)生分裂，當加入lμmol／L的激動素時，細胞
分裂效果較好。誘導產(chǎn)生的愈傷組織的生長速率和脆弱性因外植體的不
同而有很大差異。用于懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)介質(zhì)要能夠使愈傷組織生長良好
。
