固定體積培養(yǎng)介質(zhì)細胞懸浮培養(yǎng)實驗圖像顯微鏡
懸浮培養(yǎng)的類型
分批培養(yǎng)
分批培養(yǎng)指在固定體積的培養(yǎng)介質(zhì)中進行的細胞懸浮培養(yǎng)。在培養(yǎng)
過程中？細胞分裂和細胞生長使得懸浮培養(yǎng)物的生物量不斷增加。當培
養(yǎng)環(huán)境(可利用的營養(yǎng)和氧氣)中出現(xiàn)限制因子時，細胞停止生長，生物
量便不再增加。
培養(yǎng)時間的模式曲線
①滯后期：此期為細胞分裂做準備。
②指數(shù)期：細胞分裂速度較快。
③線形期：細胞分裂速度減慢，細胞伸長生長速度增加。
④減速期：細胞分裂和細胞伸長速率都減小。
⑤穩(wěn)定期：細胞數(shù)目和大小保持恒定。
當細胞被轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基中開始培養(yǎng)時，細胞就處于滯后期，這
是分批培養(yǎng)的較開始階段，此時期的細胞還沒有分裂。滯后期的細胞可
用來分析特定代謝物的合成和某種生理活動的速率。緊跟滯后期的是細
胞分裂期(即指數(shù)期)，此時期持續(xù)的時間很短，指數(shù)期時，每單位生物
量濃度的生物量增加是一定的且是可以測量的。生物量通常是指每毫升
培養(yǎng)物中的細胞數(shù)目。一般地，在細胞分裂到3—4代后，細胞生長開始
降低，較后，細胞數(shù)目達到穩(wěn)定期，此時細胞干重開始下降。穩(wěn)定期是
分批培養(yǎng)中細胞生長周期的較后階段，此時生物量和細胞數(shù)量都沒見有
明顯的增加。培養(yǎng)時可以通過頻繁(周期為2—3d)地進行亞培養(yǎng)而使細
胞維持在指數(shù)生長期。由于細胞能利用胞內(nèi)的儲備物和死亡細胞所釋放
的可再利用代謝物，所以細胞可以存活幾天。穩(wěn)定期細胞的穩(wěn)定性取決
于生長限制因子的種類和特點(如因氮缺乏而達穩(wěn)定期的細胞的存活時
間比碳缺乏的要長)。處于穩(wěn)定期的細胞被轉(zhuǎn)移人新的培養(yǎng)基進行繼代
培養(yǎng)后，細胞就依次通過滯后期、很短暫的指數(shù)生長期、相對生長速率
下降時期，接著又再次進入穩(wěn)定期。進入末期前，細胞的體積在增大。
一般按照慣例，每次繼代培養(yǎng)都是開始于相對較高的細胞密度，所以再
次進入穩(wěn)定期前，細胞只進行有限的分裂(細胞數(shù)目加倍)。
一般來說，細胞懸浮培養(yǎng)的目的是獲得生長速率較快、均一的細胞
，而且所有細胞都是活的。在適當?shù)呐囵B(yǎng)基中頻繁地進行繼代培養(yǎng)，獲
得的細胞就可以同時具有這些特點。如果懸浮培養(yǎng)的細胞是用于做實驗
，則繼代培養(yǎng)的時間間隔不要超過一周。
