穿刺培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)-光合細(xì)菌的菌種培養(yǎng)檢測顯微鏡
方法與步驟
光合細(xì)菌的菌種培養(yǎng)
1.取球形紅假單胞菌和沼澤紅假單胞菌原種培養(yǎng)物,分別在M瓊脂
培養(yǎng)基試管中穿刺接種,每種接二支。
2.取一支已穿刺接種的試管,加入混合石蠟液于試管頂部,以此
與氧隔絕,置于28℃下,用2000~50001x強(qiáng)度光進(jìn)行光照培養(yǎng)。}昆合
石蠟液由液體石蠟和固體石蠟以1:1比例,加熱后混合配制而成。
3.另一支已穿刺的試管放入?yún)捬醺變?nèi),用焦性沒食子酸和碳酸鈉
反應(yīng)來消除氧,并用真空泵抽氣減壓,造成一個(gè)理想的厭氧環(huán)境(參見
實(shí)驗(yàn)1-9)。
4.與石蠟封蓋試管相同,置于28℃,光照下培養(yǎng)4~5天,在沿穿
刺線上長出鮮紫紅色或橘紅色的菌苔時(shí),表明接種菌已生長成功。
5.在厭氧缸中的培養(yǎng)管瓊脂頂部,加入1-2mL滅菌的液體石蠟進(jìn)行
保種。
光合細(xì)菌的增殖培養(yǎng)
1.在500ml磨口錐形瓶中加入已滅菌的范尼爾氏液體培養(yǎng)基,至接
近瓶頸部。
2.取上述穿刺培養(yǎng)的光合細(xì)菌菌種,用接種環(huán)挑取部分培養(yǎng)物,
轉(zhuǎn)入瓶內(nèi),然后用液體培養(yǎng)基加滿至瓶口,小心用瓶蓋蓋緊