微生物接種培養(yǎng)基-細(xì)胞數(shù)目變化測量顯微鏡
當(dāng)把微生物接種到新鮮培養(yǎng)基后,群體細(xì)胞一般都呈現(xiàn)出一種
特有的生長圖形。在生長起始有一延遲期,然后細(xì)胞以指數(shù)形式開
始生長。當(dāng)必需營養(yǎng)物耗盡或有毒性物質(zhì)積累時(shí)則生長停止,群體
細(xì)胞進(jìn)入穩(wěn)定期。如果繼續(xù)培養(yǎng),細(xì)胞或許開始死亡,則認(rèn)為群體
處于衰亡期。
√以數(shù)學(xué)方法計(jì)算生長適用于生長曲線什么時(shí)期?
√什么時(shí)候不會有延遲期出現(xiàn)?
√為什么細(xì)胞會進(jìn)入穩(wěn)定期?
生長的測定
群體生長既可以從細(xì)胞數(shù)目變化測量也可從細(xì)胞總的重量測量
。這里有幾種測量細(xì)胞數(shù)目和估測細(xì)胞粗重方法,適用于不同微生
物或不同問題。細(xì)胞總數(shù)測定
可以通過在顯微鏡下直接計(jì)算一定量樣品而測定群體細(xì)胞數(shù)目
,如:顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。已經(jīng)有兩種直接用顯微鏡計(jì)算微生物數(shù)
目方法,一種是樣品干燥固定在載片上,另一種是液體樣品。對液
體樣品來說,需要使用特殊的計(jì)數(shù)小室。在這樣一個(gè)計(jì)數(shù)小室中,
是在一玻璃載片的表面刻上了一個(gè)已知小面積的方格
在方格上每一小面積都具有一已知的體積,體積極小,但卻是精確
測量過的。方格上單位面積中的細(xì)胞數(shù)可以在顯微鏡下計(jì)算出,這
樣就可以測量出每一小室體積中的細(xì)胞數(shù)目。那么就可以計(jì)數(shù)室用
顯微鏡計(jì)數(shù)步驟。很容易地把這個(gè)數(shù)值轉(zhuǎn)化成每升細(xì)胞懸浮液中細(xì)
胞數(shù)目。根據(jù)小室樣品體積,把此數(shù)值乘以一個(gè)轉(zhuǎn)換系數(shù)即可。