微生物細胞化學(xué)物質(zhì)的純DNA樣品測定顯微鏡
生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的認識依賴于合適的研究工具的發(fā)展。對于核
酸是怎樣發(fā)揮功能的知識方面的進展一般與研究新方法的發(fā)展密切
相關(guān)。在此我們討論一些方法。
1．DNA的提取和純化。首先需要沒有其他細胞化學(xué)物質(zhì)的純DN
A樣品。這個過程就是我們要說的DNA的純化。較后一步的水溶液用
RNAase處理以便除去RNA。蛋白質(zhì)的去除是用變性溶液(通常是酚)
，通過幾次重復(fù)純化步驟，可以得到實質(zhì)上很純的DNA溶液，而不
合任何其他雜質(zhì)。
所得到的DNA溶液不是DNA分子在細胞中的天然長度。純化過程
會引起DNA的斷裂， 而形成各種長度的片段(無規(guī)則的)。如果在
純化過程中動作緩和，DNA片段的長度大約是完整染色體長度的百
分之一。
2．DNA的測定。有一些方法可用于溶液中DNA含量的測定，
一個應(yīng)用較廣泛的方法是測溶液的紫外光吸收值，DNA在波長260nm
處有很強的紫外光吸收能力。這種吸收作用是由于嘌吟和嘧啶堿基
的存在。弱，這是由于雙股DNA中兩個對應(yīng)鏈上的堿基之間相互作
用 (氫鍵)減弱了對紫外光的吸收。
3．DNA的密度梯度離心。DNA分子密度取決于分子內(nèi)精確的化
學(xué)成分
