微生物昆蟲(chóng)細(xì)菌生物測(cè)定類(lèi)型分析圖像顯微鏡廠商
微生物殺蟲(chóng)劑的生物測(cè)定主要有兩種類(lèi)型,即活體生測(cè)和離體生測(cè)
。后者是近年發(fā)展的檢測(cè)技術(shù),常見(jiàn)于昆蟲(chóng)病毒和細(xì)菌殺蟲(chóng)劑的毒力測(cè)
定。嘗試用離體生測(cè)方法確定綠僵菌幾個(gè)野生型菌株和變異株的致病力
,并與活體生測(cè)進(jìn)行平行比較,認(rèn)為離體生測(cè)可以用于鑒定不同品系的
致病力。大致過(guò)程是:首先讓定量的真菌孢子在平皿中保濕萌發(fā),吸附
后沖洗,摻入昆蟲(chóng)血細(xì)胞培養(yǎng)基,限時(shí)生長(zhǎng),制成菌絲受控培養(yǎng)基;以
HCM培養(yǎng)昆蟲(chóng)的單層血細(xì)胞,然后加入酚氧化酶活化劑,如昆布多糖等
,促使氧化酶活化,產(chǎn)生黑色素,或者加入酶的底物,即可在顯微鏡或
解剖鏡中分辨出產(chǎn)生黑色素的細(xì)胞或凝集細(xì)胞。真菌的致病力愈強(qiáng),其
抑制酚氧化酶的能力也愈強(qiáng),試驗(yàn)產(chǎn)生黑色素細(xì)胞或凝集的細(xì)胞就會(huì)少
得多,從而通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析可以斷定真菌的毒力程度。這種方法可以在一
定程度上反應(yīng)出真菌孢子的萌發(fā)率、吸附能力和產(chǎn)生毒素阻止黑色素形
成的能力。但蟲(chóng)生真菌的致病原因十分復(fù)雜,對(duì)昆蟲(chóng)的毒力是諸多因子
的綜合反應(yīng),致病力的強(qiáng)弱主要取決于入侵體壁的能力,因而這種方法
能否被人們接受而進(jìn)入實(shí)用階段,尚屬疑問(wèn)。
活體生測(cè),即以昆蟲(chóng)個(gè)體作為試驗(yàn)材料,測(cè)定或比較不同真菌制備
物對(duì)特定蟲(chóng)齡(或蟲(chóng)態(tài))的致死潛力,或測(cè)定特定制備物對(duì)不同蟲(chóng)齡(或
蟲(chóng)態(tài))的效果,另外也可測(cè)定特定制備物對(duì)特定蟲(chóng)齡在不同時(shí)間的致死
潛力。實(shí)驗(yàn)中,通常采用4個(gè)或更多的劑量制備物,以各種方式處理在
特定的時(shí)間區(qū)段的昆蟲(chóng)個(gè)體,以個(gè)體死亡數(shù)作為昆蟲(chóng)對(duì)制備物的反應(yīng),
由劑量(或濃度)一死亡率或時(shí)間一死亡率關(guān)系來(lái)比較或評(píng)價(jià)制備物的潛
力。雖然活體生測(cè)需較長(zhǎng)時(shí)間,對(duì)昆蟲(chóng)個(gè)體作為生測(cè)材料要求較高,而
且至今尚未建立起其標(biāo)準(zhǔn)品,但目前仍是唯一的實(shí)用而可信的測(cè)定蟲(chóng)生
真菌制劑毒力的方法。