電子顯微鏡下環(huán)狀寡聚體結(jié)構(gòu)類似于天然內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜
以碘離子為疏水性碰撞熒光猝滅劑,證實新生肽在轉(zhuǎn)運(yùn)過程中經(jīng)過
一個穿過膜的水孔。碘離子位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜腔一側(cè),而不是胞質(zhì)一側(cè),因
此可以碰撞到并猝滅位于膜胞質(zhì)一側(cè)核糖體內(nèi)的熒光染料。這個結(jié)果表
明,存在一條水質(zhì)通道使腔內(nèi)的碘離子可以完全通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜并擴(kuò)散進(jìn)
入核糖體。碰撞猝滅實驗還證明,核糖體中的水質(zhì)新生肽鏈通道和內(nèi)質(zhì)
網(wǎng)膜中的水質(zhì)孔在核糖體結(jié)合到膜上的都被封閉與胞質(zhì)隔絕。熒光實驗
結(jié)果綜合表明,新生肽鏈在轉(zhuǎn)運(yùn)過程中處于一種水質(zhì)環(huán)境中,這種水質(zhì)
空間只與新生分泌蛋白的目的地內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔連通。較近,利用電子顯微鏡
對純化的膜蛋白進(jìn)行觀察,已發(fā)現(xiàn)一個水質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)孔的圖像。一些在光交
聯(lián)研究中參與轉(zhuǎn)運(yùn)的蛋白質(zhì)被純化,發(fā)現(xiàn)它們形成了一種環(huán)狀的寡聚體
,結(jié)構(gòu)類似于在電子顯微鏡下觀察到的天然內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜。隨后用冰凍蝕刻
顯微技術(shù)得到的復(fù)合體與核糖體結(jié)合的照片證明,新生肽經(jīng)過的水質(zhì)孔
與核糖體通道對齊。由未進(jìn)行翻譯時的核糖體和純化的Sec61形成異源
二聚復(fù)合體,利用冰凍蝕刻電子顯微照片構(gòu)建出此異源二聚復(fù)合體的三
維結(jié)構(gòu)。
與熒光實驗得到的數(shù)據(jù)一致,核糖體與轉(zhuǎn)運(yùn)孔結(jié)合形成一個獨(dú)立封
閉的管道,這個管道從核糖體中蛋白質(zhì)合成的位置到達(dá)分泌蛋白的目的
地——內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔。
因此,在共翻譯轉(zhuǎn)運(yùn)過程中,核糖體結(jié)合到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的特定位點
,它們是水孔穿越膜雙分子層的地方。在蛋白質(zhì)合成的過程中,新生多
肽鏈通過這些孔穿過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜進(jìn)入到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔。