菌種斜面培養(yǎng)和平板培養(yǎng)技術(shù)-菌種鑒別技術(shù)
1．斜面培養(yǎng) 將培養(yǎng)基注入試管中，滅菌后擺成斜面，可較長期
貯存?zhèn)溆�。在出外采集蟲尸樣本時，可用小試管攜帶一些選擇性培養(yǎng)基
，隨時進(jìn)行分離。接種時斜面試管上貼上標(biāo)簽，注明接種菌名稱、日期
、接種人姓名等。斜面培養(yǎng)還是菌種保藏及運(yùn)輸郵寄的方便方法，它封
閉嚴(yán)密，易避免雜菌污染。
2．平板培養(yǎng) 平板培養(yǎng)是將溶化冷卻到45—50℃的瓊脂培養(yǎng)基注
入滅菌的培養(yǎng)皿中，直徑9—1cm的培養(yǎng)皿注入12—15mL。輕輕轉(zhuǎn)動培
養(yǎng)皿，使之均勻分布，凝固后即成平板。接種好的平板，為防止水分蒸
發(fā)，要翻轉(zhuǎn)倒置于恒溫箱中培養(yǎng)，多數(shù)蟲生真菌不要求高溫，一般在25
=C左右為宜，培養(yǎng)5天以后再行觀察。
根據(jù)培養(yǎng)目的不同，接種方法也不同，為觀察菌落形態(tài)或測定菌落
直徑生長量應(yīng)采取點(diǎn)植培養(yǎng)，通常自斜面上蘸取極少量孢子，點(diǎn)植于皿
的中心或成三角形的3點(diǎn)。為分離菌種則采用劃線分離培養(yǎng)和稀釋分離
培養(yǎng)。為計(jì)數(shù)活孢子數(shù)量，則采用稀釋接種培養(yǎng)。
稀釋接種培養(yǎng)方法有兩種，即基內(nèi)接種和表面接種，基內(nèi)接種是將
相應(yīng)稀釋倍數(shù)的菌液1mI，用滅菌吸管先置于滅菌皿中，再把溶化冷卻
到50℃的瓊脂培養(yǎng)基注入，迅速搖動混合均勻(順時、逆時方向各10次)
，凝固后培養(yǎng)。表面接種是把0．1ml或0．2ml的相應(yīng)菌懸液接種于平板
表面，再用玻璃刮鏟涂布均勻，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)。
