不同菌株所使用的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法都不同-細菌顯微鏡
真菌的保藏是要把培養(yǎng)條件與培養(yǎng)時間調節(jié)至細胞不過度增殖
的程度,使繁殖的細胞原樣地轉入休眠狀態(tài),為此采用隔絕空氣、降
低溫度、或使之處于干燥狀態(tài)的方法。在保藏過程中,為使菌種不
發(fā)生變異,以保存遺傳純種(純系)為好,因此應盡量保存單孢子
或單菌絲分離菌株。還必須了解對不同菌株的適當或不適當?shù)呐囵B(yǎng)
基,適當或不適當?shù)呐囵B(yǎng)方法;而對新分離的菌株要采用其近緣種
所使用的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。
保藏用培養(yǎng)基的選擇原則:①一般認為營養(yǎng)稀薄的培養(yǎng)基保存
效果更好一些。真菌在自然條件下很少遇到糖分很多的條件,在含
糖的培養(yǎng)基上,條件過于優(yōu)越,較初生長很快,但移植幾次往往就
退化,不再形成孢子。因此,保存菌種較好不用或少用糖,特別是
單糖。②在該培養(yǎng)基上應容易形成孢子。半知菌的分生孢子是傳播
單元,也是休眠體,易于保存。然而蟲霉的分生孢子壽命短,只能
短期保存,但休眠孢子可長期保存達數(shù)年之久。⑧能利用無機氮者
就不要使用有機氮源;不需維生親而能生長的微生物可使用合成培
養(yǎng)基。④對生理缺陷型菌株,培養(yǎng)基中應含有缺陷物質;耐藥物菌
株,培養(yǎng)基中應含這種藥物。⑤薩氏(葡萄糖4%,蛋白胨1%,瓊
脂1.5%)培養(yǎng)基去掉葡萄糖成分,歷來作為大多數(shù)病原性真菌的保
存培養(yǎng)基而廣泛應用。這種培養(yǎng)基去掉葡萄糖是為了防止發(fā)生變異;
但某些菌種可能會發(fā)育不佳,容易死亡。因此,可使用加1%葡萄糖
的薩氏培養(yǎng)基。此外PDA培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基也常被選用。
菌齡在菌種的保藏中也很重要,得到健壯的菌絲細胞和孢子之
后才有利于長期保存,通常是培養(yǎng)4—7天后保藏。白僵菌和擬青霉
等生長緩慢,往往需要培養(yǎng)10一14天。