懸浮顆粒-生物顆粒和大分子觀察顯微鏡
界面對(duì)所分配物質(zhì)有一定的吸附容量。對(duì)可溶性物質(zhì)通常無(wú)
顯著影響,而對(duì)懸浮顆粒卻會(huì)產(chǎn)生較大量的界面吸附。因此,在分
離細(xì)胞顆粒時(shí),事實(shí)上需考慮三相:上相、界面和下相,此時(shí),兩
相系統(tǒng)的分離是基于顆粒在這些相之間的選擇性分配。
相必須是水性的
顯然,選擇合適的相系統(tǒng)是分配方法的關(guān)鍵。用于生物顆粒和
大分子分配的相系統(tǒng)有其特殊要求,如相必須是溫和的,即必須考
慮到其水含量、離子組成、滲透壓、從顆粒中洗提出物質(zhì)的能力和
變性效應(yīng)等因素。顆粒越大,越復(fù)雜,對(duì)環(huán)境要求也越苛刻。如蛋
白質(zhì)往往能容許較廣范圍的pH及離子強(qiáng)度的變化,而細(xì)胞器則可能
對(duì)pH及鹽組成有嚴(yán)格要求。再者,為了能夠分離,這些物質(zhì)又須有
不同的分配特性,即它們對(duì)兩相應(yīng)有不同的親和性。
上面述及的某些因素排除了傳統(tǒng)的含有機(jī)溶劑兩相系統(tǒng)的應(yīng)用
。這不僅是因?yàn)橛袡C(jī)溶劑有變性作用,而且還因?yàn)樵谒袡C(jī)物系
統(tǒng)中生物顆粒和大分子幾乎總是完全分布于水相而無(wú)法分離。此外
,傳統(tǒng)相系統(tǒng)的液—液界面有較大的界面張力,易使脆弱的細(xì)胞結(jié)
構(gòu)遭到破壞。
雙水相系統(tǒng)可以克服上述缺點(diǎn),它們是由兩種不相溶的聚合物
水溶液組成。兩種不同聚合物溶于一給定溶劑時(shí)會(huì)導(dǎo)致分相,這是
個(gè)普遍現(xiàn)象。分相后聚合物水溶液中水的含量達(dá)85~99%。