涂片是將微生物培養(yǎng)物涂在載玻片上于顯微鏡下觀(guān)察
涂片
涂片(Smears)就是將一環(huán)微生物培養(yǎng)物涂在載玻片上，可以用
來(lái)觀(guān)察死的微生物。微生物剛放到載玻片時(shí)是活的，但經(jīng)固定步驟
就將其殺死了。制作涂片常是初學(xué)者的難點(diǎn)。如果涂片涂得太厚，
就難以觀(guān)察單個(gè)細(xì)胞；而如果涂得太薄，就可能會(huì)找不到微生物。
如果將那滴培養(yǎng)物涂在載玻片上時(shí)攪得太厲害，又會(huì)破壞細(xì)胞原來(lái)
的排布。這樣，通常以四聯(lián)體形式(四個(gè)一體)存在的微生物就會(huì)被
看成是單個(gè)或成對(duì)的菌體。這常常會(huì)使初學(xué)者誤以為他們看到了多
種微生物，而事實(shí)上，它們都屬于同一種微生物。
涂片后應(yīng)使其完全風(fēng)干。然后將其快速通過(guò)火焰3～4次。這個(gè)
過(guò)程稱(chēng)為熱固定(heat fixation)。熱固定主要有三個(gè)目的：①殺
死微生物；②使微生物黏附在載玻片上；③使菌體更容易染色。如
果載玻片還沒(méi)在完全風(fēng)干，你就將其在火焰上移動(dòng)，菌體就會(huì)煮沸
而被破壞。如果熱固定不夠，菌體就無(wú)法粘在載玻片上，在后續(xù)步
驟中易被沖洗掉。任何活細(xì)胞都很難著色。如果熱固定過(guò)度，微生
物將會(huì)被燒毀，你會(huì)看到被破壞的細(xì)胞和細(xì)胞殘骸。微生物的某些
結(jié)構(gòu)(如莢膜)，經(jīng)過(guò)熱固定就會(huì)被破壞，所以應(yīng)省略這一步驟，只
需通過(guò)風(fēng)干使之粘附到載玻片上。
