熒光顯微鏡用紫外線照射激發(fā)分子-光學(xué)儀器
相差顯微鏡
許多染料都會殺死微生物，因而多數(shù)微生物活體無法進(jìn)行染色
觀察。不經(jīng)染色就觀察活菌體則需要采用相差顯微鏡(Phase-contr
ast microscopy)技術(shù)。相差顯微鏡用特殊的聚光器和物鏡來強(qiáng)化
生物不同結(jié)構(gòu)的折射率差異。光通過具有不同折射率的物體時(shí)會減
速并發(fā)生衍射。不同介質(zhì)中光速的差異就會導(dǎo)致亮度的不同。諾爾
馬斯基(微分干涉差)顯微鏡
和相差顯微鏡一樣，諾爾馬斯基顯微鏡(Nomarskimicroscopy)
也是利用折射率的差異來觀察未染色細(xì)胞及其結(jié)構(gòu)。但微分干涉差
顯微鏡的分辨率比標(biāo)準(zhǔn)相差顯微鏡更高。由于景深(始終處于焦距
的標(biāo)本厚度)很小，它能產(chǎn)生近乎三維的圖像。
熒光顯微鏡
熒光顯微鏡(Fluorescence microscopy)利用紫外線照射激發(fā)
分子，使其釋放出波長比入射光更長的光。不同波長的光呈現(xiàn)出不
同亮度的橙色，黃色或黃綠色。有些微生物，如假單胞菌(Pseudo
一17zonas)，受紫外線照射時(shí)會自然發(fā)出熒光。而另外一些微生物
，如結(jié)核分支桿菌(Mycobacterium tuberculosis)和蒼白密螺旋體
(Treponema pallidum，梅毒病原菌)，必須經(jīng)發(fā)熒光的染料即熒光
染料(fluorochrome)處理后，它們才能在黑色背景下突現(xiàn)出來。吖
啶橙是一種能結(jié)合核酸的熒光染料，根據(jù)熒光顯微鏡濾光系統(tǒng)不同
，它呈現(xiàn)出明亮的綠色、橙綠色或黃色。有時(shí)，它被用來監(jiān)測樣品
中的微生物生長，它與活細(xì)胞結(jié)合會發(fā)出明亮的橙光或綠光。
