實驗室分光光度計與顯微分光光度計-光學(xué)儀器
顯微分光光度計:它用一種很窄的單色輻射束與顯微鏡系統(tǒng)相
聯(lián)。這種儀器能測定單個活細(xì)胞內(nèi)不同部位的消光。
應(yīng)用
大多數(shù)實驗室分光光度計的較一般的用途是作為優(yōu)質(zhì)比色計,
即作為光度計用以測量在顏色反應(yīng)中產(chǎn)生的生色團的量。后面即將
介紹這項技術(shù)以及分光光度法比較經(jīng)典的用法。
比色測定法:許多物質(zhì)在可見光區(qū)的消光系數(shù)微不足道,它可
以與某些別的試劑定量地反應(yīng)而生成有色產(chǎn)物。這種性質(zhì)可以作為
分析這些物質(zhì)的基礎(chǔ)。顏色是在標(biāo)準(zhǔn)條件下從這種物質(zhì)的已知量產(chǎn)
生的(生色團),并且測定這些樣品的消光,用含有除被測物質(zhì)以外
的全部試劑的參考杯作為試劑空自。用這個空白通過變化狹縫寬度
使消光讀數(shù)至零。測量的消光對應(yīng)產(chǎn)生顏色的測試物質(zhì)的量或濃度
制圖。這個圖譜叫做校準(zhǔn)曲線。然后物質(zhì)的未知量可以通過在同樣
標(biāo)準(zhǔn)條件下產(chǎn)生的顏色,測量其消光并用校準(zhǔn)曲線來決定產(chǎn)生該消
光的物質(zhì)的量來測定。因為用比較少量的物質(zhì)常常能夠產(chǎn)生比較高
的消光,所以比色測定法普遍應(yīng)用于生物化學(xué),來分析廣泛范圍的
生物學(xué)重要分子。