用熒光顯微鏡或工業(yè)相機(jī)或熒光分光度計(jì)檢測(cè)熒光
免疫熒光試驗(yàn)
大體上說(shuō)，免疫熒光(IF)分析和ELISA很相似。在免疫熒光法下，
熒光物質(zhì)標(biāo)記的檢測(cè)抗體(抗菌體抗原或抗鞭毛抗原)在同抗原結(jié)合成免
疫復(fù)合物后會(huì)發(fā)射熒光，，通過(guò)在載玻片或96孔聚苯乙烯微孔板上，利
用熒光顯微鏡或工業(yè)相機(jī)或熒光分光度計(jì)檢測(cè)熒光。采用的熒光標(biāo)記物
有羅丹明B、異氰酸熒光素以及異硫氰酸熒光素。熒光抗體技術(shù)通過(guò)兩
種基本方法進(jìn)行：在直接法中，抗原直接與熒光標(biāo)記的特異性抗體進(jìn)行
反應(yīng)；在問(wèn)接法中，一抗不用熒光標(biāo)記，但是具有種屬特異性的二抗一
k偶聯(lián)熒光素分子。在問(wèn)接法中，熒光標(biāo)記的抗體可以檢測(cè)一抗與抗原
形成的免疫復(fù)合物的存在。這樣，間接法消除了必須為每一種待檢微生
物制作熒光標(biāo)記抗體的麻煩。
側(cè)流免疫層析法
側(cè)流免疫層析分析(試紙條分析)是一種夾心分析技術(shù)，與ELlSA反
應(yīng)發(fā)生在微量滴定板的小孔中不同，側(cè)流免疫層析法是在膜上進(jìn)行的。
首先，將捕獲抗體同定于膜(預(yù)先劃定)的一個(gè)區(qū)域上，用膠體金或乳膠
顆粒預(yù)先標(biāo)記的檢測(cè)抗體也包埋在硝酸纖維素膜試紙條上；將含有特異
性抗原(微生物)的樣品加到樣品孔中，并與試紙條上檢測(cè)抗體相結(jié)合，
該免疫復(fù)合物依靠毛細(xì)虹吸作用向多孔膜的另一端遷移，在試紙條上有
兩條捕獲帶，一條特異性捕獲病原菌，另一條特異性捕獲沒(méi)有與抗原結(jié)
合的游離抗體(對(duì)照線)。如果膜上只有一條捕獲帶顯色(對(duì)照線)，意味
著這是一個(gè)陰性樣品；如果兩條帶或線都顯色，說(shuō)明結(jié)果呈陽(yáng)性。側(cè)流
分析技術(shù)在5～lOmin內(nèi)可以得到結(jié)果，簡(jiǎn)便易行，經(jīng)濟(jì)節(jié)約，適用于初
篩試驗(yàn)。
