生物發(fā)光法測量樣品中ATP含量測量微生物數(shù)量

流式細胞術

　　流式細胞術可快速對一個細胞群體進行鑒定，這種鑒定基于一些參
數(shù)，如細胞形態(tài)、核酸含量和表面抗原等。細胞用適當?shù)臒晒馑貥擞浐?BR>制成單細胞懸液，并逐個快速通過通道，同時用激光束進行檢測。通過
分析每個細胞同激光束的相互作用(散射光和熒光)，便可獲得群體中符
合預期參數(shù)的代表性菌體細胞。流式細胞術中，熒光標記的抗體可被用
來直接檢測菌體細胞。在食品微生物學中，其中一個缺點是這種方法無
法區(qū)分細胞死活以及來自于食品基質的干擾。

　　生物發(fā)光法

　　生物發(fā)光法通過測量樣品中ATP含量來間接測量微生物的數(shù)量。由
于只有活細胞中含有ATP，那么ATP的數(shù)量直接與樣品中微生物數(shù)量相關
。在mg2+存在時，用熒光素一熒光素酶系統(tǒng)(來自螢火蟲)可以測量所檢
樣品中裂解細胞的ATP濃度。這種方法可以檢測每克或每毫升食品中低
達10的2次方～10的3次方的活細菌細胞或10個酵母細胞，其也能測量設
備表面的微生物數(shù)量。這種方法非常迅速，并且使用這些方法的自動系
統(tǒng)現(xiàn)在也已經(jīng)出現(xiàn)在市場。

　　在另一種方法，來自于自發(fā)光的細菌(如弧菌)中編碼生物發(fā)光的基
因(Z眥基因)已經(jīng)克隆到一些致病菌、指示菌以及腐敗菌中。熒光素酶
催化分子氧氧化黃素單核苷酸(FMNH2)和長鏈脂醛并且發(fā)光。因為只有
活細胞可以發(fā)光，克隆有發(fā)光基因的菌株可以被用來快速評價殺死細胞
或從食品及食品環(huán)境中清除細菌的一些殺菌或除菌方法的有效性及其效
果。這種方法也被用來檢測受傷不能發(fā)光、但修復損傷后仍可發(fā)光的菌
體。現(xiàn)已經(jīng)有商業(yè)生產(chǎn)的測量反應光強的自動系統(tǒng)。

　　許多其他的快速方法、自動系統(tǒng)以及傳統(tǒng)方法模型現(xiàn)在也都已商業(yè)
化。一些已經(jīng)在文獻中經(jīng)過詳細討論并且可以被查閱。