培養(yǎng)液中細(xì)胞葡萄糖代謝實(shí)驗(yàn)觀察倒置顯微鏡
增加了培養(yǎng)液中碳酸氫鈉弱解離作用從而產(chǎn)生過(guò)剩的H+降低培
養(yǎng)液pH。因此在密閉培養(yǎng)時(shí)需要大的上方空間,其體積要比培養(yǎng)液
大10倍,這個(gè)體積對(duì)供給足夠的氧氣也是需要的。這種一般的上方
空間對(duì)于大規(guī)模培養(yǎng)或連續(xù)流動(dòng)空氣的開(kāi)放系統(tǒng)是不可能的,故后
者要求通過(guò)1個(gè)濾器供氣并通過(guò)另1個(gè)濾器抽氣。
細(xì)胞進(jìn)行葡萄糖代謝其結(jié)果是累積丙酮酸和乳酸鹽。葡萄糖代
謝比細(xì)胞要求要快,因此培養(yǎng)液中理想的葡萄糖濃度是2g幾以下,
在培養(yǎng)中補(bǔ)充葡萄糖比一開(kāi)始增加葡萄糖的濃度更好一些,用半乳
糖或果糖代替葡萄糖是一種改良,因可明顯減少乳酸的形成,但也
同時(shí)帶來(lái)生長(zhǎng)率緩慢的結(jié)果。這些防止非生理學(xué)的pH作用對(duì)小量培
養(yǎng)是成功的。當(dāng)培養(yǎng)規(guī)模擴(kuò)大時(shí),培養(yǎng)上方空間及培養(yǎng)表面面積與
培養(yǎng)液容量的比例將減少。同時(shí),為了增加細(xì)胞貼壁的表面面積及
增加單位體積的細(xì)胞密度開(kāi)發(fā)了很多系統(tǒng)。
pH控制系統(tǒng)的基本原理是一個(gè)經(jīng)高壓滅菌的pH檢測(cè)探頭,將信
號(hào)輸入pH控制器,然后換成數(shù)字或類(lèi)似的pH顯示。這是一種pH監(jiān)測(cè)
系統(tǒng)。要求按規(guī)定控制pH值的高低,pH不能超出這個(gè)范圍。pH值調(diào)
整板上的這兩個(gè)高或低規(guī)定點(diǎn)接轉(zhuǎn)到1個(gè)能起動(dòng)泵或螺線管活塞的
中繼器上,這些裝置將加入酸或堿使培養(yǎng)系統(tǒng)pH調(diào)整至規(guī)定的范圍
內(nèi)。一旦培養(yǎng)液與上方空間相平衡后,它是很少見(jiàn)到pH上升到規(guī)定
點(diǎn)之上,因而加入酸是忽略不計(jì)的,如果加入堿則推薦使用碳酸氫
鈉(5.5%)、氫氧化鈉(o.2mol幾)只能用在快速攪拌率的培養(yǎng)系
統(tǒng),因?yàn)榫植繚鈮A在被稀釋之前可損害細(xì)胞。