ATP測定是一種預(yù)測微生物數(shù)量技術(shù)-分析顯微鏡
一種最簡單ATP測定法之一是利用螢火蟲的蟲熒光素一熒光素酶系統(tǒng)測定。
在ATP存在時，用熒光檢測器檢測熒光素酶發(fā)射的熒光強(qiáng)度。螢火蟲熒光素
的發(fā)光量與添加的ATP量成正比。
在臨床微生物學(xué)中，已經(jīng)把ATP測定法作為一種預(yù)測微生物數(shù)量的快速
檢測方法應(yīng)用。在臨床實驗中，利用這種方法篩檢尿樣。該方法成功用于
菌尿癥的診斷和活性淤泥中生物量的評價口，這表明它也應(yīng)該適用于食品
微生物的檢測。ATP法能自動測定，代表它將是快速預(yù)測食品中微生物的有
效、方法。用于食品時需克服的主要問題非微生物ATP的去除。
ATP法通過擦拭指定區(qū)域和讀出熒光檢測器的相對光度單位(RLU)的方式，
已成為廣泛用于對食品表面進(jìn)行現(xiàn)場監(jiān)測的快速方法。由于非微生物ATP能
影響RLU讀數(shù)，這些方法雖然對監(jiān)控是有價值的，但是不宜用于指示菌數(shù)。
DNA探針是由來源于目的生物體的DNA序列組成，可用于檢測同源的DNA或RN
A序列。在檢測時，探針DNA必須和待測菌株雜交。理論上，探針包含一個
編碼特定產(chǎn)物的序列。探針DNA必須通過某種方式標(biāo)記以利于確定是否發(fā)生
了雜交。而mRNA、rRNA和質(zhì)粒DNA則提供了多個目標(biāo)，有助于形成更敏感的
檢測系統(tǒng)。合成的寡核苷酸探針可能有20～50個堿基組成，在合適的情況
下，只需30～60 min即可完成雜交。
在典型的探針操作中，未知生物體的DNA片段通過限制性內(nèi)切核酸酶獲
得。經(jīng)過電泳分離條帶后，轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，并與標(biāo)記探針雜交。
溫和地洗去DNA探針后，采用放射自顯影方法來檢測是否存在雜交產(chǎn)物。
