利用熒光顯微鏡檢測(cè)熒光標(biāo)記物-細(xì)菌顯微鏡
熒光抗體法
熒光抗體法(fluorescent antibody，F(xiàn)A)自1942年創(chuàng)立發(fā)展以來(lái)，廣
泛地應(yīng)用于醫(yī)學(xué)診斷和食品微生物檢測(cè)。特定抗原的抗體與熒光物質(zhì)相結(jié)
合而發(fā)出熒光，當(dāng)抗體與抗原發(fā)生反應(yīng)時(shí)，抗體一抗原復(fù)合體發(fā)出熒光，
利用熒光顯微鏡檢測(cè)。熒光標(biāo)記物通常是：羅丹明B(Rhodamine B)、熒光
異氰酸鹽和熒光異硫代異氰酸鹽；熒光異硫代異氰酸鹽應(yīng)用最為廣泛。熒
光抗體(FA)技術(shù)可以采用兩種基本的方-法：直接法是利用抗原與特異的帶
有熒光物質(zhì)抗體結(jié)合；間接法中同源抗體不與并不與熒光物質(zhì)結(jié)合，而是
利用同源抗體的抗體(抗抗體)與熒光物質(zhì)相連(抗原被同源抗體包圍，同源
抗體又被其抗抗體包圍，從而發(fā)出熒光)。在間接法標(biāo)記物可以檢測(cè)同源抗
體的存在，直接法中標(biāo)記物檢測(cè)抗原的存在。利用間接法不需要為每一待
檢的微生物制備熒光抗體。如果使用H免疫血清，F(xiàn)A技術(shù)就不需要沙門(mén)氏菌
的春培養(yǎng)物。最常用的共價(jià)是多價(jià)沙門(mén)氏菌OH球蛋白，用熒光異硫代氰酸
鹽標(biāo)記用來(lái)檢測(cè)A～Z組菌體抗原。由于沙門(mén)氏菌抗血清體可以與其他相關(guān)
微生物發(fā)生反應(yīng)，(例如：亞利桑那菌(A—zo”以)、檸檬酸桿菌(Citrobac
ter)、大腸桿菌(E．coli))。
因此，當(dāng)檢測(cè)自然污染食品時(shí)會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性的結(jié)果。CherrY和Moody[
州綜述了FA技術(shù)在醫(yī)學(xué)微生物的應(yīng)用；
